539480
Proteinase K aus Tritirachium album
Synonym(e):
Endopeptidase K
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About This Item
CAS-Nummer:
MDL-Nummer:
UNSPSC-Code:
12352202
Empfohlene Produkte
Form
lyophilized solid
Qualitätsniveau
Spezifische Aktivität
≥30 mAnson units/mg dry wt
≥40 mAnson units/mg protein
Mol-Gew.
28.93 kDa
Hersteller/Markenname
Calbiochem®
Lagerbedingungen
OK to freeze
Farbe
white
Löslichkeit
50 mM Tris-HCl, 2 mM calcium acetate, pH 8.0: soluble
Fremdaktivität
DNase, none detected (nicking activity with pBR322, incubation for 6 h at 37°C)
RNase, none detected (ribonuclease activity with MS2 RNA detected after incubation for 6 h at 37°C)
Versandbedingung
ambient
Lagertemp.
2-8°C
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Allgemeine Beschreibung
Eine Serinprotease, die eine starke proteolytische Aktivität auf zahlreiche denaturierte und native Proteine mit hohem Molekulargewicht ausübt. Aufgrund ihrer raschen proteolytischen Inaktivierung endogener Nukleasen kann sie zur Isolierung von mRNA und hochmolekularer DNA eingesetzt werden. Spaltet bevorzugt Bindungen neben der Carbonyl-Gruppe N-substituierter hydrophober, aliphatischer und aromatischer Aminosäuren. Hemmung durch DFP, Hg2+ und PMSF. Keine Inaktivierung durch Metallchelatoren, Sulfhydryl-Reagenzien, TLCK oder TPCK.
Anwendung
Nützlich zur proteolytischen Inaktivierung von Nukleasen bei der Isolierung von DNA und RNA.
Entfernt Endotoxine, die an kationische Proteine wie Lysozym und Ribonuklease A binden.
Berichten zufolge nützlich für die Isolierung von Leber-, Hefe- und Mungbohnen-Mitochondrien
Bestimmung der Enzymlokalisierung auf Membranen
Behandlung von Paraffinschnitten zur Freilegung von Antigenbindungsstellen zur Antikörpermarkierung.
Verdauung von Proteinen aus Hirngewebeproben für Prionen in der TSE-Forschung.
Entfernt Endotoxine, die an kationische Proteine wie Lysozym und Ribonuklease A binden.
Berichten zufolge nützlich für die Isolierung von Leber-, Hefe- und Mungbohnen-Mitochondrien
Bestimmung der Enzymlokalisierung auf Membranen
Behandlung von Paraffinschnitten zur Freilegung von Antigenbindungsstellen zur Antikörpermarkierung.
Verdauung von Proteinen aus Hirngewebeproben für Prionen in der TSE-Forschung.
Biochem./physiol. Wirkung
Proteinase K ist eine stabile und hochreaktive Serinprotease. Ergebnisse von Kristall- und Molekularstrukturstudien lassen darauf schließen, dass das Enzym zur Subtilisin-Familie mit einer katalytischen Triade (Asp39-His69-Ser224) im aktiven Zentrum gehört. Es ist in einer Reihe von Umgebungen stabil: pH, Puffersalze, Detergenzien (SDS) und Temperatur. In Gegenwart von 0,1–0,5 % SDS bleibt Proteinase K aktiv und verdaut zahlreiche Proteine und Nukleasen in DNA-Präparationen, ohne die Integrität der isolierten DNA zu beeinträchtigen.
Warnhinweis
Toxizität: Reizstoff (B)
Einheitendefinition
Eine mAnson-Einheit ist definiert als die Menge an Enzym, die 1,0 µmol Folin-positive Aminosäuren (berechnet als Tyrosin) pro Minute bei 37 °C und pH 7,5 freisetzt.
Physikalische Form
Lyophilisiert aus Calciumacetat
Rekonstituierung
Nach der Rekonstituierung im Kühlschrank (4 °C) aufbewahren. Stammlösungen, die in 50 mM Tris-HCl, 2 mM Calciumacetat, pH 8,0 zubereitet wurden, sind bei 4 °C bis zu 1 Jahr haltbar.
Sonstige Hinweise
Watazu, Y., et al. 1993. J. Lab. Clin. Anal. 7, 81.
Lebherz, H.G., et al. 1986. Biochem. J.233, 51.
Ebeling, W., et al. 1974. Eur. J. Biochem.47, 91.
Lebherz, H.G., et al. 1986. Biochem. J.233, 51.
Ebeling, W., et al. 1974. Eur. J. Biochem.47, 91.
Rechtliche Hinweise
CALBIOCHEM is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Signalwort
Danger
H-Sätze
Gefahreneinstufungen
Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2
Lagerklassenschlüssel
11 - Combustible Solids
WGK
WGK 1
Analysenzertifikate (COA)
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