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Roche
KAPA2G Robust HotStart ReadyMix
2 × ( contains 2 mM MgCl2 at 1×)
Synonym(e):
Hot-Start-PCR, PCR
Anmeldenzur Ansicht organisationsspezifischer und vertraglich vereinbarter Preise
Alle Fotos(5)
About This Item
UNSPSC-Code:
41106300
NACRES:
NA.55
Empfohlene Produkte
Verwendung
sufficient for 100 reactions
sufficient for 500 reactions
Qualitätsniveau
Haltbarkeit
≤12 mo.
Leistungsmerkmale
Difficult Templates/Specialty Enzymes PCR
dNTPs included
hotstart
Verpackung
kit of 1.25 mL (100 x 25 μL rxn; KK5701)
kit of 6.25 mL (500 x 25 μL rxn; KK5702)
Hersteller/Markenname
Roche
Konzentration
2 × ( contains 2 mM MgCl2 at 1×)
Methode(n)
PCR: suitable
Aufnahme
crude DNA
Lagertemp.
−20°C
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Allgemeine Beschreibung
Die KAPA2G Robust DNA-Polymerase der zweiten Generation wurde weiterentwickelt, um die uneinheitliche Amplifikation über ein großes Spektrum an Amplikontypen (GC- und AT-reich) zu beheben. KAPA2G Robust HotStart® ReadyMix™ ermöglicht eine höhere Prozessivität und spezifische Aktivität, was zu einer robusteren PCR-Leistung, höherer Sensitivität und verbesserter Toleranz gegenüber gängigen Inhibitoren führt. Die hohe Leistung von KAPA2G Robust DNA-Polymerase eignet sich ideal für schwierige PCR-Anwendungen und Proben. Dadurch wird die Erfordernis zur Optimierung mit mehreren Enzymen und Protokollen eliminiert.
Anwendung
- Amplifikation von GC- oder AT-reichen Matrizen
- Matrizen, die gängige PCR-Inhibitoren enthalten, z. B. Salze, Harnstoff, SDS oder Ethanol
- PCR von unverarbeiteten Proben, z. B. Speichelproben, kultivierte Säugetier-, Hefe- oder Bakterienzellen
- Kolonie-PCR
- DNA-Extraktion und -amplifikation
- Mutationsscreening
Biochem./physiol. Wirkung
Mit KAPA2G Robust HotStart® DNA-Polymerase erzeugte DNA-Fragmente haben die gleichen Eigenschaften wie DNA-Fragmente, die mit Wildtyp-Taq-DNA-Polymerase erzeugt werden. Sie können für routinemäßige Downstream-Analysen oder -Anwendungen, einschließlich Restriktionsenzymverdau, Klonierung und Sequenzierung verwendet werden. Wie das Wildtyp-Taq weist auch KAPA2G Robust HotStart eine 5′→3′-Polymerase- und 5′→3′-Exonuklease-Aktivität auf, jedoch keine 3′→5′-Exonuklease-(Korrekturlese-)Aktivität. Die Genauigkeit von KAPA2G Robust HotStart ist vergleichbar mit der von Wildtyp-Taq; die Fehlerquote liegt bei ca. 1 Fehler pro 1,7 x 105 einbezogenen Nukleotiden. Mit KAPA2G Robust HotStart erzeugte PCR-Produkte haben 3′-dA-Enden und können in TA-Klonierungsvektoren geklont werden.
Leistungsmerkmale und Vorteile
Wirksame Amplifikation von GC- und AT-reichen Zielen
Verbesserte Toleranz gegenüber gängigen PCR-Inhibitoren
Unübertroffene Leistung bei Kolonie-PCR
Einige Anmerkungen:
- Robuste Leistung über einen großen Bereich an GC- und AT-reichen Matrizen
- Höhere PCR-Erfolgsraten
Verbesserte Toleranz gegenüber gängigen PCR-Inhibitoren
- Wirksame Amplifikation von unverarbeiteten Proben
- Höhere Ausbeute und Sensitivität je Einheit Enzym
Unübertroffene Leistung bei Kolonie-PCR
- Höhere Ausbeute und verbesserte Konsistenz von PCR direkt aus E. coli und Hefezellen
Einige Anmerkungen:
- KAPA2G Robust HotStart ReadyMix PRC Kits enthalten KAPA2G Robust DNA-Polymerase, die für eine hohe Prozessivität und Inhibitortoleranz entwickelt wurde.
- Sowohl aufgereinigte genomische DNA als auch unverarbeitete Proben (z. B. Kolonie-PCR) können als Matrix verwendet werden.
- Verwenden Sie 15 Sek./kb Extensionszeit je Zyklus und erhöhen Sie diese bei schwierigen Amplikonen oder Matrizen auf 30 bis 60 Sek./kb.
- KAPA2G Robust HotStart ReadyMix enthält 2 mM MgCl2 bei 1X.
- KAPA2G Robust HotStart ReadyMix mit Farbstoff enthält zwei inerte Tracking-Farbstoffe, um die direkte Einschleusung in Agarose-Gele zu ermöglichen.
- KAPA2G Robust HotStart ReadyMix eignet sich ideal für Einzelprotokoll-PCR, d. h. die Amplifikation von Fragmenten variiert von 25 bis 65 % GC bis zu 1 kb lang, Verwendung eines einzelnen Reaktionsaufbau- und Durchlaufprotokolls.
- Die Reaktionsprodukte sind 3′-dA-angebunden und können zu TA-Klonierungsvektoren kloniert werden.
Qualität
Jede Charge KAPA2G Robust HotStart DNA Polymerase enthält nachgewiesen <2 % verunreinigendes Protein (Agilent Protein 230 Assay). KAPA2G Robust HotStart ReadyMix PCR-Kits werden strengen Qualitätskontrollen unterzogen, sind frei von kontaminierender Exo- und Endonukleaseaktivität und erfüllen strenge Anforderungen in Bezug auf das Maß an DNA-Kontamination.
Angaben zur Herstellung
Stellen Sie stets sicher, dass das Produkt vor der Verwendung vollständig aufgetaut und gut gemischt ist. Reagenzien können kurzzeitig (bis zu 1 Monat) bei 4 °C aufbewahrt werden. Die Langzeitaufbewahrung sollte bei -20 °C erfolgen. Vorausgesetzt, dass alle Komponenten sorgfältig gehandhabt und nicht kontaminiert werden, ist keine Beeinträchtigung des Kits zu erwarten, wenn es (unbeabsichtigt) für kurze Zeit (bis zu 3 Tage) bei Raumtemperatur gehalten wird. Die Langzeitlagerung bei Raumtemperatur und 4 °C wird nicht empfohlen. Bitte beachten Sie, dass Reagenzien, die bei Temperaturen über -20 °C gelagert werden, anfälliger für den Abbau sind, wenn sie während der Verwendung kontaminiert sind, weswegen eine Lagerung bei solchen Temperaturen auf Risiko des Anwenders erfolgt.
Sonstige Hinweise
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren vorgesehen.
Rechtliche Hinweise
HOTSTART is a registered trademark of Molecular BioProducts, Inc.
ReadyMix is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC
Nur Kit-Komponenten
Produkt-Nr.
Beschreibung
- KAPA2G Robust HotStart® DNA Polymerase 1U per 25 µL reaction
- MgCl2 2mM at 1X
- dNTP Mix 0.2 mM of each dNTP at 1X
Signalwort
Warning
H-Sätze
Gefahreneinstufungen
Acute Tox. 4 Oral - STOT SE 2
Lagerklassenschlüssel
12 - Non Combustible Liquids
WGK
WGK 1
Flammpunkt (°F)
does not flash
Flammpunkt (°C)
does not flash
Analysenzertifikate (COA)
Suchen Sie nach Analysenzertifikate (COA), indem Sie die Lot-/Chargennummer des Produkts eingeben. Lot- und Chargennummern sind auf dem Produktetikett hinter den Wörtern ‘Lot’ oder ‘Batch’ (Lot oder Charge) zu finden.
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