QIA58
BrdU-Zell-Proliferationsassay
This proliferation assay is a non-isotopic immunoassay for quantification of BrdU incorporation into newly synthesized DNA of actively proliferating cells.
Synonym(e):
Bromodeoxyuridin-Assay
Anmeldenzur Ansicht organisationsspezifischer und vertraglich vereinbarter Preise
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About This Item
UNSPSC-Code:
12352207
NACRES:
NA.84
Empfohlene Produkte
Qualitätsniveau
Verwendung
sufficient for 1000 tests
sufficient for 200 tests
Verpackung
pkg of 1 96-well plate(s)
Hersteller/Markenname
Calbiochem®
Lagerbedingungen
OK to freeze
avoid repeated freeze/thaw cycles
Aufnahme
sample type intact cells
sample type intact cells
Nachweisverfahren
colorimetric
Versandbedingung
wet ice
Lagertemp.
−20°C
Verwandte Kategorien
Allgemeine Beschreibung
Ein nicht-isotopischer Enzym-Immunassay zur Quantifizierung der Zellproliferation.Eine Beurteilung des Voranschreitens des Zellzyklus ist für Untersuchungen in vielen wissenschaftlichen Bereichen wesentlich. Die Messung des [3H]-Thymidin-Einbaus beim Eintreten der Zellen in die S-Phase ist seit langem die herkömmliche Methode für den Nachweis von Zellproliferation. Die nachfolgende Quantifizierung von [3H]-Thymidin wird mittels Flüssigszintillationszählung oder Autoradiographie durchgeführt. Diese Technik ist langsam, arbeitsintensiv und unterliegt mehreren Einschränkungen; so müssen etwa Radioisotopen gehandhabt und entsorgt werden sowie teure Geräte vorhanden sein. Eine gut etablierte Alternative zur [3H]-Thymidin-Aufnahme wurde in zahlreichen Studien belegt. Bei diesen Verfahren ersetzt Bromodeoxyuridin (BrdU), ein Thymidin-Analog, das [3H]-Thymidin. BrdU wird in neu synthetisierte DNA-Stränge von aktiv proliferierenden Zellen eingebaut. Nach der teilweisen Denaturierung von doppelsträngiger DNA wird BrdU immunchemisch nachgewiesen, was die Beurteilung der Zellpopulation mit aktiver DNA-Synthese gestattet. Beim Calbiochem® BrdU-Zell-Proliferationsassay wird BrdU in Zellen eingebaut, die in Platten kultiviert werden; die BrdU-Immunmarkierung nutzt die Zellschicht als feste Phase. Der resultierende Assay ist empfindlich, schnell, einfach durchzuführen und für einen großen Probendurchsatz geeignet. Zusätzlich zur Evaluierung der Zellproliferation können auch Informationen wie Zellzahl, Morphologie und die Analyse zellulärer Antigene aus einer einzigen Kultur gewonnen werden.
Der BrdU-Zell-Proliferationsassay ist ein nicht-isotopischer Immunassay zur Quantifizierung des BrdU-Einbaus in neu synthetisierte DNA von aktiv proliferierenden Zellen. Er ist empfindlich, schnell und einfach auszuführen.
Dieser Proliferationsassay ist ein nicht-isotopischer Immunassay zur Quantifizierung des BrdU-Einbaus in neu synthetisierte DNA von aktiv proliferierenden Zellen.
Hinweis: 1 T = 1 Test.
Komponenten
BrdU-Markierung, Fixierungs-/Denaturierungslösung, BrdU-Antikörper, Antikörper-Verdünnung, an Peroxidase konjugiertes Anti-Maus-IgG von der Ziege, Konjugat-Verdünnung, Substrat, Platten-Waschkonzentrat, Stopplösung und ein Anwenderprotokoll.
Warnhinweis
Toxizität: Mehrere Toxizitätswerte, siehe MSDS (O)
Spezifikationen
Testzeit: 3 Std.
Prinzip
Der Calbiochem® BrdU-Zell-Proliferationsassay ist ein nicht-isotopischer Immunassay zur Quantifizierung des Bromodeoxyuridin-Einbaus in neu synthetisierte DNA von aktiv proliferierenden Zellen.
Lagerung und Haltbarkeit
Den gesamten Inhalt des Kits nach dem Eingang bei -20 °C in einem nicht-frostreien Gefrierschrank lagern.
Vor der Verwendung:
1. Die Fixierungs-/Denaturierungslösung entnehmen und mindestens 4 Stunden vor der Verwendung bei Raumtemperatur stehen lassen. Ausfällungen, die möglicherweise in kaltem Zustand auftreten, sollten sich wieder auflösen.
2. Das an Peroxidase konjugierte Anti-Maus-IgG von der Ziege mit der geeigneten Menge 1X PBS rekonstituieren.
• Für das 200-Testkit das Anti-Maus-IgG-Peroxidase-Konjugat mit 125 µl 1X PBS rekonstituieren. Weitere chargenspezifische Verdünnungen mit der Konjugat-Verdünnung vornehmen.
• Für das 1000-Testkit das Anti-Maus-IgG-Peroxidase-Konjugat mit 250 µl 1X PBS rekonstituieren. Weitere chargenspezifische Verdünnungen mit der Konjugat-Verdünnung vornehmen.
Die Lösung 10 Minuten bei Raumtemperatur stehen lassen (oder bis die Lösung klar wird). In kleine Aliquote aufteilen; Aliquote, die nicht am gleichen Tag verwendet werden, sollten bei -20 °C in einem nicht-frostfreien Gefrierschrank gelagert werden.
Sobald die Bestandteile des Kits zur Verwendung aufgetaut sind:
• BrdU-Markierung und 100x Anti-BrdU-Antikörper in kleine Aliquote aufteilen und mit dem Anti-Maus-IgG-Peroxidase-Konjugat bei -20 °C in einem nicht-frostfreien Gefrierschrank lagern; wiederholte Einfrier-/Auftauzyklen vermeiden.
• Alle anderen Kit-Komponenten (Substrat, Antikörper-Verdünnung, Konjugat-Verdünnung, 20x Platten-Waschkonzentrat, Fixierungs-/Denaturierungslösung, Stopplösung) sollten bei 4 °C gelagert werden.
Vor der Verwendung:
1. Die Fixierungs-/Denaturierungslösung entnehmen und mindestens 4 Stunden vor der Verwendung bei Raumtemperatur stehen lassen. Ausfällungen, die möglicherweise in kaltem Zustand auftreten, sollten sich wieder auflösen.
2. Das an Peroxidase konjugierte Anti-Maus-IgG von der Ziege mit der geeigneten Menge 1X PBS rekonstituieren.
• Für das 200-Testkit das Anti-Maus-IgG-Peroxidase-Konjugat mit 125 µl 1X PBS rekonstituieren. Weitere chargenspezifische Verdünnungen mit der Konjugat-Verdünnung vornehmen.
• Für das 1000-Testkit das Anti-Maus-IgG-Peroxidase-Konjugat mit 250 µl 1X PBS rekonstituieren. Weitere chargenspezifische Verdünnungen mit der Konjugat-Verdünnung vornehmen.
Die Lösung 10 Minuten bei Raumtemperatur stehen lassen (oder bis die Lösung klar wird). In kleine Aliquote aufteilen; Aliquote, die nicht am gleichen Tag verwendet werden, sollten bei -20 °C in einem nicht-frostfreien Gefrierschrank gelagert werden.
Sobald die Bestandteile des Kits zur Verwendung aufgetaut sind:
• BrdU-Markierung und 100x Anti-BrdU-Antikörper in kleine Aliquote aufteilen und mit dem Anti-Maus-IgG-Peroxidase-Konjugat bei -20 °C in einem nicht-frostfreien Gefrierschrank lagern; wiederholte Einfrier-/Auftauzyklen vermeiden.
• Alle anderen Kit-Komponenten (Substrat, Antikörper-Verdünnung, Konjugat-Verdünnung, 20x Platten-Waschkonzentrat, Fixierungs-/Denaturierungslösung, Stopplösung) sollten bei 4 °C gelagert werden.
Sonstige Hinweise
Aufgrund der Natur der in dieser Lieferung enthaltenen Gefahrgüter können zusätzliche Versandkosten erhoben werden. Bestimmte Größen sind ggf. von den Versandzuschlägen für Gefahrgüter ausgenommen. Um weitere Informationen über diese Versandzuschläge zu erhalten, kontaktieren Sie bitte Ihren lokalen Vertrieb.
Hardonk, M.J. and Harms, G. 1990. Acta histochemica, Suppl.39, 99.
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Lanier, T. L., et al. 1989. Carcinogenesis10, 1341.
Magaud, J.-P., et al. 1988. J. Immunol. Methods106, 95.
Collins, S.J. 1987. Blood70, 1233.
Porstmann, T., et al. 1985. J. Immunol. Methods82, 169.
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Morstyn, G., et al. 1983. J. Clin. Invest.72, 1844.
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Rechtliche Hinweise
CALBIOCHEM is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Signalwort
Danger
Gefahreneinstufungen
Carc. 2 - Eye Irrit. 2 - Flam. Liq. 2 - Met. Corr. 1 - Muta. 1B - Repr. 2 - Skin Irrit. 2 - Skin Sens. 1
WGK
WGK 3
Flammpunkt (°F)
69.8 °F
Flammpunkt (°C)
21 °C
Analysenzertifikate (COA)
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