Allgemeine Beschreibung
Zellen reagieren sehr unterschiedlich auf ihre Umgebung durch intrazelluläre Signalübertragung. Der TGFβ;-Signalweg spielt eine zentrale Rolle bei einer Reihe von normalen zellulären Prozessen wie Proliferation, Differenzierung, Apoptose, Migration, Adhäsion, Immunantwort und anderen Funktionen der meisten Zellen. Obwohl der TGFβ;-Signalweg eine Vielzahl von Prozessen steuert, ist der Signalweg recht einfach. TGFβ;-Dimere binden an den TGFβ;-Typ-II-Rezeptor, der den TGFβ;-Typ-I-Rezeptor rekrutiert und phosphoryliert. Anschließend rekrutiert und phosphoryliert der Typ-I-Rezeptor SMAD2/3, das dann an SMAD4 bindet und einen Komplex bildet, der in den Zellkern eindringt, wo er als Transkriptionsfaktor für verschiedene Gene wirkt. Der TGFβ;-Rezeptor aktiviert den SMAD-abhängigen kanonischen Signalweg sowie SMAD-unabhängige nicht-kanonische Signalwege wie z. B. PI3K/Akt, ERK, JNK und p38. Eine gestörte TGFβ;-Signalübertragung ist an der Entstehung zahlreicher Krankheiten beteiligt, darunter hämatologische Malignome wie Leukämie, Wundheilungsstörungen, neurodegenerative Erkrankungen, Entwicklungsstörungen und Lungenhochdruck. Funktionsverlust-Mutationen fördern die Tumorentstehung durch Unterdrückung des Immunsystems und der epithelial-mesenchymalen Transition (EMT), obwohl die TGFβ;-Signalübertragung auch mit einer Tumorhemmung in Verbindung gebracht wurde. Immunzellen wie B-Zellen, T-Zellen, dendritische Zellen und Makrophagen sezernieren TGFβ;, wodurch ihre Proliferation, Differenzierung und Aktivierung durch andere Zytokine herunterreguliert wird. Veränderungen bei der TGFβ;-Signalübertragung wurden daher mit Autoimmun- und Entzündungskrankheiten sowie Krebserkrankungen in Verbindung gebracht.
Spezifität
Die Kreuzreaktivität zwischen den Antikörpern und allen anderen Analyten in diesem Panel ist nicht nachweisbar oder vernachlässigbar.
Anwendung
Intrazelluläre Multiplex-Assays auf Bead-Basis mit Luminex-Technologie ermöglichen die gleichzeitige relative Quantifizierung von mehreren Phosphorylierungs- und Gesamtsignalwegproteinen in Gewebe- und Zelllysatproben. Die Multiplexing-Ergebnisse mit denen des Western Blotting vergleichen.Für beste Ergebnisse wird eine Inkubation über Nacht (4 °C) empfohlen.Für diesen Test werden 25 μ;l verdünntes Zelllysat pro Well benötigt.Dieses Kit muss mit Assay-Puffer 1 (im Lieferumfang enthalten) verwendet werden.1–25 μ;g Zelllysat/Well (empfohlene Ausgangskonzentration: 40 bis 1.000 μ;g Protein/ml).Verfügbare Analyten:Akt (Ser473); ERK (Thr185/Tyr187); Smad2 (Ser465/Ser467); Smad3 (Ser423/Ser425); Smad4 (gesamt); TGFβ;RII (gesamt)
Lagerung und Haltbarkeit
Die empfohlene Lagertemperatur für die Kitkomponenten ist 2–8 °C.
Rechtliche Hinweise
Luminex is a registered trademark of Luminex Corp
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xMAP is a registered trademark of Luminex Corp
Haftungsausschluss
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