Trypsin inhibitor

Trypsin inhibitor from Glycine max (soybean) has been used as a standard molecular weight marker in electrophoresis.

Dieser Inhibitor wirkt gegen Trypsin und in geringerem Maß auch gegen Chymotrypsin und Plasmin. Er hemmt auch Proteasen mit ähnlichen Mechanismen wie Trypsin, Plasmakallikrein und Gerinnungsfaktor X. Der Trypsininhibitor wirkt nicht gegen Metallproteasen, gewebebasiertes Kallikrein, Säureproteasen oder Thioproteasen. Dieser Inhibitor wirkt, indem er einen 1:1-stöchiometrischen Komplex mit der proteaseaktiven Stelle bildet und anschließend eine einzelne Arginin-Isoleucin-Bindung an dem Inhibitor spaltet. Die Hemmung ist sowohl reversibel als auch pH-Wert-abhängig.

The soybean trypsin inhibitor is a monomeric protein containing 181 amino acid residues in a single polypeptide chain crosslinked by two disulfide bridges.

Eine Trypsineinheit = A₂₅₃ von 0,001 je Minute mit N-Alpha-benzoyl-L-argininethylester (BAEE) als Substrat bei einem pH-Wert von 7,6 und 25 °C.

One trypsin unit = A₂₅₃ of 0.001 per minute with N-alpha-benzoyl-L-arginine ethyl ester (BAEE) as substrate at pH 7.6 at 25 °C.

Der Trypsininhibitor ist zu 10 mg/ml in Wasser und Phosphatpuffern löslich. Er ist in Balanced Salt Solutions zu 1 mg/ml und in serumfreien Medien löslich. Konzentrierte Lösungen von mehr als 10 mg/ml können trüb und gelblich bis bernsteinfarben sein. Nach der Trypsinisierung von Zellen in 1 ml Trypsininhibitorlösung zu 1 mg/ml für jeden ml Trypsinlösung für die Dissoziation erneut suspendieren. Die Zellsuspension sollte anschließend bei 1.000 U/min zentrifugiert werden, um ein Zellpellet zu bilden.

Lösungen können eine Aktivität behalten, wenn sie kurzzeitig bei 2–8 °C gelagert werden. Lösungen sind in gefrorenen Aliquoten bei -20 °C stabil.