JumpStart^™ Taq ReadyMix^™ für quantitative PCR

JumpStart^™ Taq ReadyMix^™ ist eine gebrauchsfertige, doppelt konzentrierte Master-Mischung mit JumpStart^™ Taq DNA-Polymerase, 99 % reinen dNTPs, Reaktionspuffer und JumpStart^™ Taq-Antikörper. Sie kombiniert die Leistungsverbesserungen unserer JumpStart^™ Taq-Antikörper für Heißstart-PCR mit der Zweckmäßigkeit einer einfach zu verwendenden Reaktionsmischung. Da es keine Farbstoffe enthält, ist es die ideale Lösung für quantitative PCR-Methoden mit hohem Durchsatz, bei denen Fluoreszenzsonden eingesetzt werden. Die Taq DNA-Polymerase ist ein Antikörper-inaktiviertes Heißstartenzym. Wenn die Reaktionstemperatur 70 °C erreicht, löst sich der DNA-Polymerase-Antikörper-Komplex auf und die Taq DNA-Polymerase-Aktivität ist wiederhergestellt. Dieser Antikörper-Enzym-Komplex ermöglicht ein einfaches und bequemes Einrichten mit einem geringeren Kontaminationsrisiko als bei manuellen Heißstarttechniken.

JumpStart^™ Taq ReadyMix^™ für die quantitative PCR wird wie folgt verwendet:

• für die quantitative Polymerase-Kettenreaktion(PCR)-Amplifikation von revers transkribierter HIV-1-RNA und -DNA unter Verwendung von Sonden
• in einem zweistufigen RT-qPCR-Assay zur Quantifizierung von revers transkribierter RNA in einer Studie zur Überwachung der Aktivität von Süßholz bei der TReg-Zelldifferenzierung und -Funktion
• als Komponente der Reaktionsmischung für den Nachweis und die Amplifikation von Salmonella sp. und interne Amplifikationskontrolle (IAC) pUC-19-Plasmid-DNA
• als Komponente der Reaktionsmischung für den Nachweis von Clostridium difficile mittels quantitativer Polymerase-Kettenreaktion (qPCR)
• für die quantitative Echtzeit-PCR von revers transkribierter ß-Arrestin-1(ARRB1)- und β-Arrestin-2(ARRB2)-mRNA

Der Referenzfarbstoff von Sigma für quantitative PCR ist im Lieferumfang dieses ReadyMix-Produkts zur Normalisierung der Reaktionsdaten separat enthalten. Der Farbstoff hat ein Anregungsmaximum von 586 nm und ein Emissionsmaximum von 605 nm. Die Geräteeinstellungen für ROX-Referenzfarbstoff reichen für die Messung von Referenzfarbstoffen für die quantitative PCR. Ein Röhrchen 25 mM MgCl₂ ist zur Vereinfachung der Optimierung der qPCR-Reaktion ebenfalls enthalten.

Das Standardreaktionsvolumen beträgt 50 μL.

20RXN ist verpackt als 1 X 500 μL.
100RXN ist verpackt als 1 X 2,5 mL.
400RXN ist verpackt als 1 X 10 mL.

JumpStart Taq ReadyMix für quantitative PCR kombiniert die Vorteile eines Heißstart-Enzyms mit einem gebrauchsfertigen Gemisch für die durchsatzhohe quantitative PCR (qPCR). Das Produkt wird ohne Nachweischemikalien hergestellt. Daher eignet es sich für die Verwendung mit unterschiedlichen Formaten, einschließlich doppelt markierten Sonden, Molecular Beacons oder doppelsträngigen, bindenden Farbstoffen wie SYBR Green I.

ReadyMix enthält JumpStart-Taq-DNA-Polymerase, 99 % reine Deoxynucleotide und Puffer in einem optimierten Zweifachkonzentrat. Um eine Reaktion vorzubereiten, werden 25 μL ReadyMix zu Primern, Template, Nachweischemikalien und Wasser zugegeben, damit das Reaktionsvolumen insgesamt bei 50 μL liegt. Die Einrichtung kann bei Zimmertemperatur erfolgen, da der JumpStart-Taq-Antikörper die Taq-DNA-Polymerase inaktiviert. Während des ersten Denaturierungszyklus trennt sich der Antikörper vom Enzym und die volle Aktivität wird wiederhergestellt. Es sind keine besonderen Maßnahmen oder Protokolländerungen notwendig.

Eine Einheit baut 10 nmol der gesamten dNTPs in 30 Minuten bei 74 °C in säurefällbare DNA ein.

Eine Lizenz für die Durchführung des patentierten 5′-Nuklease-Verfahrens zu Forschungszwecken wird mit dem Erwerb (i) des autorisierten 5′-Nuklease-Core-Kits und der lizenzierten Sonde, (ii) eines lizenzierten 5′-Nuklease-Kits oder (iii) von Lizenzrechten von Applied Biosystems erworben.

Dieses Produkt ist ein autorisiertes 5′-Nuklease-Core-Kit. Die Verwendung dieses Produkts unterliegt einem oder mehreren der folgenden Ansprüche außerhalb der USA, die US-Patenten Nr. 5.210.015 und 5.487.972 entsprechen. Der Erwerb dieses Produkts umfasst eine beschränkte, nicht übertragbare Immunität gegenüber Rechtsschutzverfahren gemäß den oben genannten Patentansprüchen für den ausschließlichen Gebrauch dieser Menge des Produktes für eigene interne Forschungsanwendungen des Käufers. Mit dem separaten Erwerb einer lizenzierten Sonde würden die Rechte unter US-Patenten und entsprechenden Patentansprüchen außerhalb der USA übertragen: 5.538.848, 5.723.591, 5.876.930, 6.030.787, 6.258.569, 5.804.375 (nur Ansprüche 1–12) und Patentansprüche außerhalb der USA, die US-Patent 6.214.979 entsprechen. Es wird weder ausdrücklich noch implizit oder durch Rechtsverwirkung ein Rechtsanspruch unter anderen Patentsprüchen, ein Rechtsanspruch zur Erbringung kommerzieller Leistungen jeglicher Art übertragen, einschließlich, aber nicht beschränkt auf, das Berichten der Ergebnisse aus den Aktivitäten des Käufers gegen Entgelt oder andere kommerzielle Gegenleistungen. Dieses Produkt ist nur für Forschungszwecke vorgesehen. Diagnostische Verwendungen nach Roche-Patenten erfordern eine gesonderte Lizenz von Roche. Weitere Informationen über den Erwerb von Lizenzen erhalten Sie vom Director of Licensing, Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California, 94404, USA.

Eppendorf is a registered trademark of Eppendorf AG

JumpStart is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC

ReadyMix is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC

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