Zelllinie THP 1 human

Humane monozytäre Leukämie

Abgeleitet aus dem peripheren Blut eines 1 Jahr alten Kindes männlichen Geschlechts mit akuter monozytärer Leukämie. THP-1-Zellen haben Fc- und C3b-Rezeptoren und weisen keine Immunglobuline an der Oberfläche und im Zytoplasma auf. Diese Zellen färben auch positiv für α-Naphthylbutyratesterase, produzieren Lysozyme und sind phagozytär (sowohl Latexkügelchen als auch sensibilisierte Erythrozyten). THP-1-Zellen können auch die Reaktion von aufgereinigten T-Lymphozyten auf Concanavlin A wiederherstellen, eine erhöhte CO₂-Produktion bei der Phagozytose zeigen und z. B. mit DMSO in makrophagenähnliche Zellen differenziert werden.

Mit der THP-1-Zelllinie human wird Folgendes untersucht:

• die bakterizide Aktivität von Moxifloxacin gegen Staphylococcus aureus
• die Wirkung der lipopolysaccharidvermittelten Entzündungsreaktion in murinen versus menschlichen Zelllinien
• die Auswirkungen von Purinnukleosiden auf das In-vitro-Wachstum von Cryptosporidium parvum
• die Veränderung der Genexpression nach Infektion mit Mycobacterium tuberculosis
• die Induktion von Zytokinen in der Zelllinie in Gegenwart von Antigenen, die aus Clostridium difficile gewonnen wurden

STR-PCR-Daten: Amelogenin: X,Y
CSF1PO: 11,13
D13S317: 13
D16S539: 11,12
D5S818: 11,12
D7S820: 10
THO1: 8, 9,3
TPOX: 8,11
vWA: 16

RPMI 1640 + 2 mM Glutamin + 10 % fötales Kälberserum (FKS).

Wenn Sie mit einer gefrorenen Ampulle anfangen, sollte das Gefrierschutzmittel entfernt werden. Die aufgetauten Zellen in ein konisches Zentrifugenröhrchen, z. B. ein 15-mL-Röhrchen, geben und dem Röhrchen langsam 4 mL Kulturmedium zusetzen. Zum Zählen der Zellen eine Probe der Zellsuspension, z. B. 100 μL, entnehmen. Die Zellsuspension bei niedriger Drehzahl, d. h. 100–150 x g maximal 5 Minuten lang zentrifugieren. Das Medium entfernen und das Zellpellet in einer Dichte von 3–5 x 100.000 Zellen/mL in frischem Medium mit 20 % Serum resuspendieren. Gefäß bei 37 °C, 5–7 % CO2, inkubieren. Täglich kontrollieren. Gefäß in einer senkrechten Position belassen, bis die Zellen die exponentielle Wachstumsphase erreicht haben. Das kann bis zu 7 Tage dauern. Sobald die Kultur fertig ist, kann die Serumkonzentration auf 10 % reduziert werden. Um die Zellen in exponentiellem Wachstum zu halten, sollten die Kulturen zwischen 3–8 x 100.000 Zellen/mL belassen werden. Benötigt 5 % DMSO und 95 % fötales Kälberserum (FKS) als Gefrierschutzmittel. Aufgrund der Schwierigkeiten, die beim ersten Start dieser Zelllinie auftreten können, wird ein wachsendes Auftragsvolumen empfohlen. Bei nicht begründeten Beanstandungen wird das Ersatzprodukt zum vollen Preis berechnet.

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