Anti-CREB-Antikörper

Zyklisches AMP-responsive Element-bindendes Protein 1 (UniProt P16220; auch bekannt als cAMP-reaktives Element-bindendes Protein 1, CREB-1) wird durch das Gen CREB1 (Gen-ID 1385) beim Menschen kodiert. CREB ist ein Transkriptionsfaktor, der die cAMP-Reaktionselemente (CRE) bindet und die Transkription der nachgeschalteten Gene reguliert. Die CREB-Aktivität wird durch Phosphorylierung durch verschiedene Kinasen, darunter PKA und Ca2+/Calmodulin-abhängige Proteinkinasen, reguliert. Zu den Genen, die bekanntermaßen durch CREB reguliert werden, gehören c-fos, BDNF, Tyrosinhydroxylase, Neuropeptide (wie Somatostatin, Enkephalin, VGF und Corticotropin-Releasing-Hormon) sowie die Gene für die zirkadiane Uhr PER1 und PER2. CREB ist für die Gedächtnisbildung bei einer Vielzahl von Spezies von entscheidender Bedeutung.

Dieser Antikörper erkennt CREB.

Epitop: Aminosäuren 5–24.

KLH-konjugiertes, synthetisches Peptid (CSGAENQ QSGDAAVTEAENQQ), das AS 5–24 von humaner CREB entspricht. Die immunisierende Sequenz ist beim Schwein identisch, teilt 19 von 20 Resten mit Maus und Rind und 18 von 20 Resten mit der Ratte.

Analyse mittels Immunpräzipitation: 10 µg einer repräsentativen Charge immunpräzipitierten CREB in 500 µg HeLa-Kernextrakt.
Analyse mittels Chromatin-Immunpräzipitation (ChIP): Mit einer repräsentativen Charge wurde eine verstärkte CREB-Belegung des LYPD3-Promotors in LKB1-defizienten humanen TE-4-Speiseröhrenkrebszellen festgestellt (Gu, Y., et al. (2012). Oncogene. 31(4):469–479).
Analyse mittels Chromatin-Immunpräzipitation (ChIP): Mit einer repräsentativen Charge wurde die CREB-Assoziation an den RNASET2-Stellen, auf die das vom T-Zell-Leukämie-Virus Typ 1 (HTLV-1) kodierte Tax-Protein abzielt, anhand der HTLV-1-infizierten humanen T-Zelllinien MT-2, C8166/45 und SLB-1 nachgewiesen (Polakowski, N., et al. (2011). Viruses. 3(8):1485-500).
Analyse mittels Chromatin-Immunpräzipitation(ChIP): Mit einer repräsentativen Charge wurde die CREB-Belegung am hBDNF-Promotor IV anhand von Chromatinpräparaten aus postmortalem humanen Parietalkortexgewebe nachgewiesen (Pruunsild, P., et al. (2011). J. Neurosci. 31(9):3295-3308).
Analyse mittels Chromatin-Immunpräzipitation(ChIP): Mit einer repräsentativen Charge wurde die CREB-Belegung am miR-9-2-Promotor in humanen SK-N-BE-Neuroblastomzellen nachgewiesen (Laneve, P., et al. (2010). Nucl. Acids Res. 38(20):6895-6905).
ChIP-seq-Analyse: Mit einer repräsentativen Charge wurden CREB-Zielgene in GC1-spg-Zellen aus Spermatogonien der Maus durch ChIP-seq-Analyse identifiziert (Martianov, I., et al. (2010). BMC Genomics. 11:530).
Western-Blot-Analyse: Mit repräsentativen Chargen wurde CREB in Lysaten von kultivierten embryonalen striatalen Neuronen und PC12-Pheochromozytomzellen der Ratte nachgewiesen (Hutchinson, A.N., et al. (2012). Neuropsychopharmacology. 37(2):321-337; Maharjan, S., et al. (2010). J. Neurochem. 112(1):42–55).
Western-Blot-Analyse: Mit repräsentative Chargen wurde CREB im Zelllysat des proximalen Caput epididymis-1 (PC-1) der Maus und in Hippocampus-Gewebehomogenaten nachgewiesen (Hamzeh, M., und Robaire, B. (2011). J. Endocrinol. 209(1):55-64; Zhou, Z., et al. (2009). Neuropharmacology. 56(1):81–89).
Western-Blot-Analyse: Mit einer repräsentativen Charge wurde CREB in humanem SK-N-BE-Neuroblastom-Zelllysat nachgewiesen (Laneve, P., et al. (2010). Nucl. Acids Res. 38(20):6895-6905).
Elektrophoretischer Mobilitätsverschiebungstest (EMSA): Eine repräsentative Charge verursachte eine Superverschiebung des DNA-CREB-Komplexes im EMSA unter Verwendung eines radioaktiv markierten Oligonukleotids, das die CREB-bindende Sequenz des hBDNF-Promotors I und Lysaten von KCl-behandelten primären Rattenneuronen (Pruunsild, P., et al. (2011). J. Neurosci. 31(9):3295–3308).

Anti-CREB-Antikörper, Best.- Nr. 06-863, ist ein hochspezifischer polyklonaler Kaninchen-Antikörper, der auf CREB abzielt und in der Chromatin-Immunpräzipitation (ChIP), in ChIP-seq, im elektrophoretischen Mobilitätsverschiebungstest (EMSA), in der Immunpräzipitation und in Western-Blot getestet wurde.

Forschungskategorie
Epigenetik & Zellkernfunktion

Forschungsunterkategorie
Transkriptionsfaktoren

Beurteilt mittels Western Blot in HeLa-Kernextrakt.

Western-Blot-Analyse: Mit 0,5 µg/ml dieses Antikörpers wurde CREB in 10 µg HeLa-Kernextrakt nachgewiesen.

~43 kDa beobachtet.

Ersetzt: 04–218

Aufgereinigter polyklonaler Kaninchenantikörper in Puffer mit 0,1 M Tris-Glycin (pH-Wert 7,4), 150 mM NaCl mit 0,05 % Natriumazid und 30 % Glycerin.

Mit Protein A aufgereinigt

Bei -20 °C ab Empfangsdatum 1 Jahr haltbar.
Handhabungsempfehlungen: Das Fläschchen nach Empfang und vor dem Abnehmen der Kappe zentrifugieren und die Lösung vorsichtig mischen. In Mikrozentrifugenröhrchen aliquotieren und bei -20 °C aufbewahren. Wiederholte Einfrier-/Auftauzyklen sind zu vermeiden, da sie das IgG beschädigen und die Produktleistung beeinträchtigen können.
Hinweis: Ein Abfallen der Gefrierschranktemperatur unter -20 °C kann dazu führen, dass glycerinhaltige Lösungen während der Lagerung einfrieren.

Kontrolle
Positive Antigenkontrolle: Best.-Nr. 12-309, HeLa-Zellkern-Extrakt. Geben Sie das gleiche Volumen reduzierenden Laemmli-Probenpuffers zu 10 μl Extrakt und kochen Sie das Gemisch 5 Minuten lang ein. Beladen Sie 20 μg reduziertes Extrakt je Bahn für Minigele.

Konzentration: Die chargenspezifische Konzentration entnehmen Sie bitte dem Analysenzertifikat.

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